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雞飼料中黃曲霉毒素應用案例
樣品提?。?/span>
? 稱取5g雞飼料樣品（粉碎并過1mm分樣篩）于50mL離心管中，加入20mL提取液（95%乙腈-水溶液）混勻
? 超聲提取30min，放入離心機（8000r/min離心20min），取上清液作為樣品提取液
樣品凈化：
? 步驟1：向試管中加入5mL樣品提取液
? 步驟2：將凈化柱橡膠頭從試管頂端插入試管中，并向下壓凈化柱至試管底端
? 步驟3：將凈化柱上部凈化后的樣品提取液倒出至樣品瓶或EP管中
? 步驟4：取2mL凈化提取液，氮吹至干，用1mL或0.5mL初始流動相復溶，過微孔濾膜，上機分析
HPLC檢測條件：
? 流動相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50:50，v:v）
? 等梯度洗脫條件：A，68%；B，32%
? 色譜柱：C18柱（柱長250mm，柱內徑4.6mm，填料粒徑5μm）
? 流速：1.0mL/min
? 柱溫：40℃
? 進樣量：50μL
? 熒光檢測：激發波長：360nm；發射波長：440nm，光化學柱后衍生
實驗結果：
黃曲霉毒素混標液相色譜圖
(AFG1和B1濃度為5ng/mL；AFG2和B2濃度為1.5ng/mL）
雞飼料陰性樣品與陰性加標樣品對比圖
(AFG1和B1加標濃度為10ng/g；AFG2和B2加標濃度為3ng/g)
雞飼料樣品Z低檢出限、加標回收率與重復性
(AFG1和B1加標濃度為10ng/g；AFG2和B2加標濃度為3ng/g)
黃曲霉毒素 | Z低檢出限（ng/g） | 回收率（%） | 重復性RSD（n=3,%） |
AFG2 | 0.12 | 84.0 | 2.64 |
AFG1 | 0.22 | 84.1 | 3.47 |
AFB2 | 0.14 | 76.0 | 2.32 |
AFB1 | 0.26 | 82.4 | 2.81 |
